疫苗生产传代细胞系Vero的同工酶分析研究

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龙吉海 张松 黄林

成都生物制品研究所,四川成都610023

国际标准刊号：ISSN 1671-4695

国内统一刊号：CN 11-4749

摘　　要:

目的通过对传代Vero细胞系的同工酶分析，确保Veto细胞作为病毒培养基质的安全性。方法用聚丙烯酰胺凝胶不连续电泳法使同工酶得以分离。结果所获Vero细胞系同工酶谱条带数量清晰、同工酶组成未发生改变。结论该传代Vero细胞系可以作为疫苗生产的原始细胞库细胞。[著者文摘]

关键词:

Vero细胞同工酶乳酸脱氢酶核苷磷酸酶

采用其作为病毒培养基质用于生产，具有无外源因子污染，易太规模生产以及生产工艺简单等诸多优点。Vero细胞狂犬病疫苗、乙型脑炎疫苗、脊髓灰质炎疫苗均已研制成功，疫苗使用后证明其安全有效?。因为Vero细胞对虫媒病毒敏感，作为人用疫苗的生产用细胞系必须确保Vem细胞作为病毒培养基质的安全性及提供质量均一的细胞。本文从Vem细胞的同工酶方法来验证传代Vero细胞的安全性。1 材料和方法1．1 材料1．1．1 Vem细胞进入指数生长期、生长旺盛的传代145、169 代Vem细胞。1．1．2 试剂电极缓冲液(pH 8．3)，分离胶缓冲液(pH 8．9)，浓缩胶缓冲液(pH 6．7)，核黄素液，20％(w／v)蔗糖液，过硫酸铵溶液由本室配制。乳酸脱氢酶(LDH)同工酶染色液：①1 M乳酸钠溶液：取2．5 ml；②Tfis—HC1缓冲液(O．5 M，PH7．5)：取3．8 ml；③烟酰胺腺嘌呤双核苷酸(NAD+)溶液；按10 mg／ml配制。取1．25 ml；④......