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转基因玉米目标基因纯合体快速准确的PCR鉴定方法

《分子植物育种》2009年 第3期 | 刘楠 陈化榜   山东农业大学作物生物学国家重点实验室 泰安271018
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摘 要:本文以转基因玉米NK603为例,介绍了一种检测目标基因纯和体的PCR方法。该方法利用4个引物的多重PCR反应,这4个PCR引物分别来自于目标基因的5’端(5’TP)和3’端(3’TP)DNA序列,目标基因5’端一侧的玉米基因组DNA序列(5’GP),以及目标基因3’端一侧的玉米基因组DNA序列(3’GP)。视玉米个体有无目标基因以及目标基因的杂合/纯和状态,PCR扩增可得到三种不同的结果:如果被检测个体无目标基因,5'GP与YGP间的玉米基因组DNA将被扩增,PCR只产生一条条带;如果被检测个体是目标基因的纯合体,5'GP与5'TP及3’TP与3'GP间的DNA将被扩增,PCR则产生两条条带;如果被检测个体是目标基因的杂合体,5'GP与3'GP、5'GP与5'TP以及3'TP与YGP间的DNA将都被扩增,PCR则产生三条条带。三条不同长短的PCR产物条带在琼脂糖凝胶上清晰可分,易于辨别。和费时昂贵的定量PCR相比,该方法简单、快速、结果准确,在目标基因位点玉米基因组DNA序列已知的前提下,该方法可扩展到诸如Bt11、Event176、GA21、MON810、MON863和TC1507等任何转基因玉米的回交转育程序中。
【分 类】【农业科学】 > 农作物 > 禾谷类作物 > 玉米(玉蜀黍)【工业技术】 > 轻工业、手工业 > 食品工业 > 一般性问题 > 食品标准与检验 > 食品分析与检验
【关键词】 转基因玉米 NK603 纯合性检测 多重PCR
【出 处】 《分子植物育种》2009年 第3期 619-623页 共5页
【收 录】 中文科技期刊数据库

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