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转mCherry基因水稻的遗传分析及T-DNA整合位点的研究

《分子植物育种》2012年 第2期 | 李亚丽 刘中来 周洁 徐国娟 瞿绍洪   浙江师范大学 化学与生命科学学院 金华321004 浙江省农业科学院 病毒学与生物技术研究所 杭州310021
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摘 要:为了建立转基因水稻的高通量遗传分析系统,本研究以粳稻成熟胚诱导的愈伤组织为受体材料,潮霉素磷酸转移酶(HPT)为抗性筛选标记,通过农杆菌介导的方法将红色荧光蛋白基因mCherry导入水稻。在水稻转化愈伤组织、转化植株(T0)和转基因后代(T1)均检测到红色荧光,证实mCherry在转基因水稻中稳定表达。139个独立转化株系的遗传分析表明,mCherry在转基因后代表现多种遗传模式,54%的转基因株系呈单位点遗传。TAIL-PCR进一步验证转基因整合到水稻基因组。根据T-DNA整合位点DNA序列分析结果,T-DNA左边界发生碱基缺失、增加和替换,右边界只发生碱基缺失,说明左边界比右边界有更多的碱基变异类型。此外,对T2代植株mCherry和HPT的转录水平进行实时定量逆转录PCR分析,结果表明,mCherry和HPT转录水平因T-DNA在水稻基因组中的整合位置而变化,表现位置效应。本研究在mCherry荧光蛋白和其它相关方法的基础上,为转基因水稻遗传及分子分析建立了一个高效的流程体系。
【分 类】【农业科学】 > 农作物 > 禾谷类作物 >
【关键词】 水稻 MCHERRY 转基因 T-DNA 整合位点 遗传分析
【出 处】 《分子植物育种》2012年 第2期 121-130页 共10页
【收 录】 中文科技期刊数据库

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