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水稻细胞色素P450基因家族成员CYP81A6基因RNAi载体构建

《分子植物育种》2016年 第2期 | 田迪 刘早利 陈亚红 王春台 刘新琼   中南民族大学生命科学学院武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室生物技术国家民委重点实验室
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摘 要:水稻P450基因家族成员CYP81A6参与稻瘟病抗性反应,为了深入研究该基因的功能,本研究利用3次克隆的策略构建了该基因的RNAi载体。首先设计带有酶切位点的基因特异性引物,以c DNA为模板扩增3’非翻译区的特异片断,将目的产物连接到T载体上,经菌落PCR和酶切鉴定后进行测序。测序结果表示,目的片断已正确克隆到T载体上。然后利用双酶切通过2次亚克隆将目的片断以反向重复克隆到RNAi载体ds1301,通过分子检测表明,CYP81A6的RNAi载体构建成功,有助于后续的基因功能和作用机理的研究。
【分 类】【生物科学】 > 植物学 > 植物细胞遗传学 > 植物基因工程
【关键词】 水稻 CYP81A6 RNA干涉 基因克隆
【出 处】 《分子植物育种》2016年 第2期 370-373页 共4页
【收 录】 中文科技期刊数据库

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