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诺丽转基因植株的Southern杂交鉴定

《分子植物育种》2018年 第20期 | 蒲振蕊 蓝增全 吴田   西南林业大学园林学院国家林业局西南风景园林工程技术研究中心 昆明650224 西南绿色发展研究院 昆明650224
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摘 要:诺丽是含籽量非常多的植物,种子占据了果实的大部分空间。为了实现无籽化诺丽,本课题组通过将引进的无籽基因转化至诺丽中,获得了大量的诺丽抗性芽,经检测鉴定获得了一些阳性转化子。在检测鉴定中由于非特异性扩增、农杆菌污染等问题难免出现一些假阳性转化子,因此,为了检测无籽基因是否真正整合到诺丽染色体上,采用地高辛随机引物标记法标记探针对诺丽转化子进行Southern杂交检测,以检测无籽基因在诺丽植株上的整合情况。检测过程包括基因组DNA的提取酶切、质粒酶切、探针的制备、转膜、杂交等。本实验选用8个转无籽基因的诺丽苗,编号为G1、G3、G4、G5、G7、G8、G9、G10,1个阴性对照,编号为T;另外,取无籽基因质粒作为阳性对照组。结果显示,在检测的8个样品中,只有诺丽转基因株系G9有杂交条带,说明无籽基因成功转入到G9染色体上。在通过转基因生物安全评价申请后,筛选出来具有目的基因并且正常表达的G9株系能够继续进行下一步的田间释放,进而做下一步的实验研究。
【分 类】【农业科学】 > 农业基础科学
【关键词】 无籽基因 转化子 阳性植株
【出 处】 《分子植物育种》2018年 第20期 6723-6728页 共6页
【收 录】 中文科技期刊数据库

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