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乳酸片球菌L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
黄彦 韦宇拓 张黎 陈发忠 黄日波 广西大学生命科学与技术学院／发酵与酶工程研究所 南宁530005
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摘要：与其它微生物相比，用大肠杆菌进行发酵生产乳酸有许多优势，但大肠杆菌没有L．乳酸脱氢酶基因，不能利用糖发酵生L．乳酸。本文采用PCR技术，以乳酸片球菌（Pediococcusacidilactici）基因组DNA为模板，克隆得到L-乳酸脱氢酶（L-lactatedehydrogenase）基因，将该基因的ORF连接到表达质粒pET-22b（＋），获得重组质粒pET—1dhL．将pET—1dhL质粒转化大肠杆菌BL21株，实现了1dhL基因的表达；对含有1dhL基凼的重组菌株进行表达研究，在30℃以IPTG诱导8h后，SDS．PAGE分析可见明显特异性条带，酶活力达到6．49u／mL，足野生菌酶活力（2．82u／mL）的2．3倍，对重组表达的L-乳酸脱氢酶生物学特性研究显示，它们的最适反应温度为27．30℃，最适反应pH为5．0，5．3，图5参15 | |
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| 格式：PDF 页数：1 页 页码范围：30-30页 | ||
| 学科分类： | ||
| 关 键 词：L-乳酸 L-乳酸脱氢酶 乳酸片球菌 克隆 表达 | ||
| 来源期刊：《中国生物学文摘》2007年 第4期 | ||
| 收录数据库：中文科技期刊数据库 | ||
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