EC109细胞cDNA微矩阵基因芯片的建立及其方法学分析

李沛[1] 凌志强[2] 赵继敏[1] 杨洪艳[1] 黄幼田[1] 董子明[1]

[1]郑州大学基础医学院病理生理学教研室,郑州450052 [2]Shiga University of Medical Science, Japan 520-2192

摘  要:

目的:建立食管癌EC109细胞CDNA微矩阵基因芯片,并对其可靠性进行验证。方法:提取正常食管上皮细胞和EC109细胞的mRNA,逆转录得CDNA,再逆转录得CRNA,用Cy3-duTP标记EC109细胞CRNA,用Cy5-duTP标记正常食管上皮细胞CRNA,制备表达谱探针,利用该探针对EC109细胞与正常食管上皮细胞进行杂交。荧光扫描基因芯片,筛选表达谱。利用自身比较实验、重复实验和R^2、一致率(C冠)及假阳性率(即冠)等指标对该基因芯片系统进行方法学分析。结果:该基因芯片系统2次实验结果的符合率达85%,R^2=0.7329,CR=100%。该系统的FPR为0.45%,扩增样品与无扩增样品的基因表达谱表现出较好的吻合性。结论:该芯片系统具有良好的稳定性、可靠性及低误差率等特点,可用于基因差异表达谱的分析。 (共3页)

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