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一种灵敏的体外溶栓活性检测方法——薄层聚丙烯酰胺纤维蛋白胶板法的建立

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赵明[2] 潘映红[3] 王一丁[1] 郭宝林[4] 冯定胜[1]

[1]四川师范大学生命科学学院,四川成都610068 [2]中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100094／／四川师范大学生命科学学院,四川成都610068 [3]中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100094 [4]中国医学科学院-中国协和医科大学药用植物研究所,北京100094

《中国药学杂志》

2005年第40卷第4期

摘　　要:

目的建立一种用于体外溶栓活性精确定量分析和高通量溶栓药物筛选鉴定的方法。方法使用聚丙烯酰胺代替琼脂糖作载体，用平板电泳制胶模具代替玻璃或塑料平皿制作可控制厚度的、均匀的薄层聚丙烯酰胺纤维蛋白胶板，用染色剂指示纤维蛋白降解情况。结果最适条件为胶板胶合0．5mg·mL^-1纤维蛋白原和10％丙烯酰胺，加样后37℃保湿温育8-12h，用考马斯亮蓝染色，观察纤维蛋白降解后产生的透明圈。本方法最低可检测出25ng蚓激酶的活性；蚓激酶浓度在0．01-5mg·mL^-1时，浓度对数与其所产生的透明圈两垂直直径算术平均值平方的对数成良好的线性关系(r=0．9997)；重复性试验RSD为3．83％(n=5)。结论本方法是一种值得推广的溶栓活性体外检测方法。 (共3页)