学术
人前列腺干细胞抗原在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备
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顾正勤[1,2] 许传亮[1] 孙颖浩[1] 高旭[1] 王林辉[1]
[1]第二军医大学长海医院泌尿外科,上海200433 [2]复旦大学华山医院泌尿外科,上海200040
国际标准刊号：ISSN 0258-879X
国内统一刊号：CN 31-1001
摘 要:
目的：克隆并在大肠杆菌中表达人前列腺干细胞抗原（PSCA）基因，制备其抗血清。方法：通过PCR方法扩增包含蛋白融合点的PSCA基因片段，经DNA测序证实后克隆至带有Trx．6His标签的原核表达载体pET32a，重组质粒转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导表达，SDS-PAGE分析表达结果，经Ni—NTA树脂亲和纯化的蛋白皮下注射免疫小鼠，ELISA检测抗血清的滴度，免疫组化鉴定其特异性。结果：PCR扩增得到241bp的目的片段，序列测定证实与GenBank上登录的序列一致；成功构建了PSCA基因片段的原核表达载体pET32a—PSCA；在大肠杆菌中表达，于相对分子质量为20．4×10。处有一蛋白新生带；PSCA融合蛋白免疫小鼠后，ELISA确认抗血清的滴度〉1：4000。抗血清检测到前列腺癌组织中PSCA的表达。结论：成功克隆、表达了人PSCA融合基因片段，并制备了相应的抗血清。[著者文摘]
文章出处:
《第二军医大学学报》-2006年27卷3期 -344-346页
Academic Journal of Second Military Medical University
栏目信息:
分 类 号:
文献标识码:
B
文章编号:
0258-879X（2006）03-0344-03
[参考文献]
Expression of human prostate stem cell antigen in E. coli and preparation of its antiserum
Gu ZhengQin;Xu ChuanLiang;Sun YingHao;Gao Xu;Wang LinHui
收稿日期: 2005-09-15
修订日期: 2005-11-01
基金资助:
国家自然科学基金（39900147）;上海市科技启明星计划资助项目（02QBl4001）
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