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靶向Survivin基因的短发卡RNA对U251细胞生长和凋亡的影响

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甄海宁[1] 章翔[1] 章薇[1] 杨彤涛[2] 白文涛[3] 付洛安[1] 胡世颉[1] 潘灏[1] 高大宽[1] 王西玲[1]

[1]第四军医大学西京医院全军神经外科研究所,西安710033 [2]唐都医院全军骨科中心,西安710033 [3]基础部微生物学教研室,西安710033

《中华实验外科杂志》

2006年第23卷第1期

摘　　要:

目的观察Survivin基因特异性短发卡RNA（shRNA）对人脑胶质母细胞瘤U251细胞体外生长和细胞凋亡的影响。方法对U251细胞，稳定转染Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1-SR的U251-SR细胞，以及稳定转染空载体pWH1的U251-P细胞。分别采用细胞计数法绘制生长曲线和平板克隆形成实验观察各组细胞的体外生长情况；采用流式细胞术（FCM）定量测定各组细胞的细胞周期和凋亡细胞数量；采用HE染色、Hoechst染色和原位末端标记（TUNEL）方法观察各组细胞形态学特征。结果与U251和U251-P细胞相比，U251-SR细胞生长明显减缓（P〈0．01），细胞克隆形成明显减少（P〈0．01）；U251-SR细胞G1期细胞增多，S期细胞减少，凋亡细胞增加至20．9％，并呈现典型的细胞凋亡形态学改变。结论靶向Survivin基因的特异性shRNA能够在体外明显抑制U251细胞的生长并诱导其发生大量凋亡。 (共4页)