人间充质干细胞免疫学性质的对比研究

常静[1] 雷寒[1] 陈建斌[2] 贾锋鹏[1]

[1]重庆医科大学附属第一医院心内科,重庆400016 [2]重庆医科大学附属第一医院血液内科,重庆400016

摘  要:

目的:对比研究人间充质干细胞(AMSCs)在体内和体外的免疫学性质,为心肌的干细胞移植技术应用于临床打下基础。方法:将免疫功能正常的SD大鼠、免疫功能缺陷的RUN大鼠共72只随机分为6组,分别为:①SD大鼠心肌梗死模型+AMSCs移植组(①组);②SD大鼠心肌梗死模型+AMSCs移植+免疫抑制剂组(②组);③RUN大鼠心肌梗死模型+AMSCs移植组(③组);④SD大鼠心肌梗死模型+人胚胎干细胞(ES)移植组(④组);⑤SD大鼠心肌梗死模型+ES移植+免疫抑制剂组(⑤组);⑥RUN大鼠心肌梗死模型+ES移植组(⑥组)。心肌梗死模型通过结扎左冠状动脉前降支建立,1周后再次开胸,在梗死心肌周围多点注射移植物。分别于移植后第2天、第1周、第2周及第6周处死每组的部分大鼠,用荧光原位杂交及免疫组化的方法分别检测移植细胞的存活、分化及淋巴细胞的浸润情况。同时,移植后第1周对于移植AMSCs的大鼠,分离其外周血中的淋巴细胞,在体外与AMSCs进行混合淋巴细胞培养(MLC)实验,了解移植后大鼠免疫系统对AMSCs是否具有免疫排斥反应。结果:①、④组注射局部可见大量淋巴细胞的浸润,移植细胞在1周后从体内几乎完全消失;①组的MLC结果显示,AMSCs促进淋巴细胞的增殖反应。②、③、⑤、⑥组注射局部可见少量淋巴细胞浸润,移植细胞长期存活,但至移植6周存活细胞有所减少,且未检测到移植细胞向心肌方向的分化;②、③组的MLC结果显示,AMSCs不仅不促使反而抑制淋巴细胞增殖。结论I尽管体外研究证实AMSCs具有低免疫源性和较完善的免疫调节作用,当AMSCs进行异种移植时仍存在免疫排斥反应,同ES进行异种移植所产生的免疫反应相似。另外,存活的移植细胞未发生向心肌方向的分化。

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