学术
花粉管通道法转基因技术在甜瓜品种河套蜜瓜上的应用
哈斯阿古拉 牛一丁 张丽 包常华 李建国 方天祺 扈廷茂
内蒙古大学生命科学学院生物工程中心,内蒙古自治区牧草与特色作物生物技术重点实验室,呼和浩特010021
摘 要:
为建立甜瓜（CucumismeloL．）简便易行转化频率高的转基因技术，以甜瓜品种河套蜜瓜为受体材料，以含gus基因的植物双元表达载体pPZP221为外源基因供体，进行了花粉管通道法转基因研究．自交授粉后分别于1、2、3、4、5、6、7、8、9、10h，切去柱头上端1／3部分，立即滴加质粒DNA溶液，果实成熟后收获转化种子．对T0代植株进行PCR检测，结果表明不同时间处理所得到的T0代植株均具有较高的转化频率，其中授粉后7h滴加DNA溶液所获得的转化率为28．3％．对一部分PCR阳性的T0代植株基因组DNA进行Southern杂交分析，结果表明所有样品均出现特异性杂交条带，证明外源基因已整合到受体植物基因组中．[著者文摘]
文章出处:
《内蒙古大学学报：自然科学版》-2007年38卷4期 -419-423页
分 类 号:
文献标识码:
A
文章编号:
1000-1638（2007）04-0419-05
Establishment of a Melon Transformation Technique via the Pollen-tube Pathway Method
Hasi Agula,NIU Yi-ding, ZHANG Li, BAO Chang-hua, LI Jian-guo,FANG Tian-qi,HU Ting-mao （Biotechnology Center, College of Life Sciences, lnner Mongolia University lnner Mongolia Key Laboratory of Herbage ＆ Endemic Crop Biotechnology,Hohhot 010021 ,China）
Abstract:
In order to establish a simple, practical technique with high transformation frequency in melon （Cucurnis melo L. ）, the pollen-tube pathway method was used for melon transformation. The melon cultivar Hetao was used as a recipient and the plant binary vector pPZP221 containing gus gene was used as donor DNA. The plasmid DNA solution was applied to the cut surfaces of stigmas at 1,2,3,4,5,6,7,8,9,and 10 h after hand-pollination,respectively, The PCR results show that the transformation rate of all T0seedlings is very high and the highest rate is up to 28.3% at 7 h after pollination. Southern blot analysis confirmed that foreign DNA was indeed inserted into the genome of transgenic T0seedlings.[著者文摘]
Key words:
melon （Cucumis melo L. ） ; pollen-tube pathway; transformation ; transgene ; hetaomelon
基金资助:
国家自然科学基金资助项目（30160053）I国家转基因植物研究与产业化专项课题（JY04-B-02）
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