您的位置:网站首页 > 《中文科技期刊数据库》 > 医药卫生 > 临床医学 > 内分泌与代谢疾病 > 摘要

针对人SND1基因两个AUG的细胞应激分析

《天津医药》2014年 第7期 | 高星杰 何津岩 葛林 张毅 付雪 尹洁 张纬 史雪彬 苏征 姚智 杨洁   天津医科大学基础医学研究中心 300070 天津医科大学基础医学院 300070 天津医科大学药学院 300070
在线阅读 ★ 收藏 | 分享
  • 第1页
  • 第2页
  • 第3页
  • 第4页
论文服务:
摘 要:目的:针对人SND1基因2个蛋白翻译起始密码子AUG构建真核表达质粒pCMV-N-Flag-SND1-No1/2,并分析2个AUG在SND1应激颗粒形成中的作用。方法以SND1全长转录本为模板,PCR法扩增含BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点的目的基因SND1-No1/2,双酶切法分别酶切目的基因片段和线性pCMV-N-Flag,以T4-DNA连接酶将两者连接成pCMV-N-Flag-SND1-No1/2重组质粒,然后将构建的重组质粒转染入HeLa细胞内,以Western印迹法检测Flag标签(DYKDDDDK)与SND1-No1/2的融合表达,最后以细胞免疫荧光实验检测在氧化应激状态下Flag-SND1-No1/2融合蛋白与内源性SND1应激颗粒的胞内共定位情况。结果以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒无误,Western印迹结果检测到融合蛋白Flag-SND1-No1/2的表达;细胞免疫荧光结果显示Flag-SND1-No1/2均可与内源性SND1应激颗粒共定位。结论重组pCMV-N-Flag-SND1-No1/2质粒构建成功,SND1基因第1个AUG的缺失并不影响SND1应激颗粒的形成。
【分 类】【医药、卫生】 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 胰岛疾病 > 糖尿病
【关键词】 重组融合蛋白质类 应激 质粒 基因表达 SND1 应激颗粒 SND1
【出 处】 《天津医药》2014年 第7期 625-629页 共5页
【收 录】 中文科技期刊数据库