您的位置:网站首页 > 《中文科技期刊数据库》 > 医药卫生 > 临床医学 > 口腔科 > 摘要

慢病毒携带增强型绿色荧光蛋白基因标记大鼠脂肪干细胞及体内示踪研究

《现代口腔医学杂志》2019年 第5期 | 张瑶瑶 吴国民 张潇毅 王琳 肖艳菊 王祥伸 陈楷   吉林大学口腔医院口腔颌面外科·吉林省牙发育及颌骨重塑与再生重点实验室 长春130021 济南市章丘区妇幼保健院口腔科
购物车 | ★ 收藏 | 分享
论文服务:
摘 要:目的探讨慢病毒携带增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)标记大鼠脂肪干细胞(ADSCs)最适感染复数,检测EGFP-ADSCs干细胞特性及体内活性。方法提取培养大鼠脂肪干细胞,流式细胞仪表型鉴定及成骨、成脂、成软骨多向诱导分化。采用携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体(Lentivirus-EGFP)以不同的感染复数MOI=0、1、5、10、25、50转染ADSCs,流式细胞仪测转染率,筛选合适MOI。CCK8测转染后ADSCs的增殖能力。EGFP-ADSCs成骨、成脂、成软骨诱导后分别行碱性磷酸酶、油红O及阿尔新蓝染色检测。将标记后的细胞注射到大鼠皮下,术后1,2,4w取材行冰冻切片荧光观察及免疫组织化学染色,观察EGFP-ADSCs在体内的表达情况。结果 CD90阳性表达,CD34阴性表达,脂肪干细胞向成骨、成脂、成软骨分化。MOI=0、1、5、10、25、50的转染率分别是0.12%、3.62%、42.4%、66.6%、90.4%、98.0%。CCK8法测转染组(MOI=25)与未转染组(MOI=0)细胞增殖能力无明显差别。EGFP-ADSCs经诱导后仍向成骨、成脂、成软骨分化。1w,2w,4w见细胞于移植部位。结论慢病毒介导的EGFP基因标记大鼠脂肪干细胞最适感染复数为25,且不影响干细胞活性及多向分化潜能,可以成为标记脂肪干细胞的理想方法。
【分 类】【医药、卫生】 > 口腔科学 > 口腔病理学
【关键词】 脂肪干细胞 慢病毒 增强型绿色荧光蛋白 多向分化
【出 处】 《现代口腔医学杂志》2019年 第5期 257-260页 共4页
【收 录】 中文科技期刊数据库