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猪瘟病毒衣壳蛋白靶向核酸酶表达系统的建立及鉴定

《病毒学报》2008年 第6期 | 周斌 刘珂 陈溥言   南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 江苏南京210095
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摘 要:根据猪瘟病毒衣壳蛋白(C)基因序列设计一对引物,RT—PCR扩增获得编码猪瘟病毒衣壳蛋白的C基因,将其插入到含有葡萄球菌核酸酶(SN)基因的真核表达载体pcDNA-SN中,筛选获得重组质粒pcDNA—C—SN。脂质体转染猪肾细胞(PK-15),并经G418稳定筛选,通过RT—PCR、免疫印迹和间接免疫荧光鉴定表达的融合蛋白,体外DNA消化试验检测核酸酶活性。结果表明融合蛋白C—SN在PK-15细胞中获得了稳定表达,能够被兔抗猪瘟病毒衣壳蛋白多抗所识别,并具有良好的核酸酶活性,能够对DNA进行切割。同时,稳定表达融合蛋白C-SN的PK15细胞系中能够有效抑制猪瘟野毒的增殖,使其感染性降低10^2~10^3倍。这些结果为进一步将衣壳蛋白靶向病毒灭活策略应用于抵抗猪瘟病毒感染奠定了基础。
【分 类】【农业科学】 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学(兽医学) > 兽医基础科学 > 家畜微生物学(兽医病原微生物学) > 家畜病毒学
【关键词】 猪瘟病毒 衣壳蛋白 葡萄球菌核酸酶 抗病毒感染
【出 处】 《病毒学报》2008年 第6期 451-455页 共5页
【收 录】 中文科技期刊数据库

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