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稳定表达乙脑病毒结构蛋白的细胞系的建立

《病毒学报》2009年 第4期 | 刘珊 黄莺 杨鹏 孙志伟 俞炜源   军事医学科学院生物工程研究所蛋白质工程室 北京100071
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摘 要:以乙型脑炎病毒SA14-14-2疫苗株全长基因组克隆质粒pBR-JTF为模板,通过PCR分别扩增prM-E及C-prM-E基因片段,构建表达乙型脑炎病毒结构蛋白的真核表达质粒pCJE-ME及pCJE-CME。将这2种重组质粒用脂质体法转染BHK-21细胞后,质粒pCJE-ME表现明显的细胞毒性,转染细胞不能存活;质粒pCJE-cME可导致筛选到表达JEV结构蛋白的稳定细胞系,这种稳定表达JEV结构蛋白的细胞系通过PCR扩增细胞系基因组、ELISA、Western Blot、间接免疫荧光等方法得到鉴定。研究结果表明在C蛋白存在下,乙型脑炎病毒C-prM-E蛋白可以在BHK细胞中稳定表达,为研制JEV新型复制子颗粒疫苗提供了便利工具。
【分 类】【医药、卫生】 > 基础医学 > 医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学) > 人体病毒学(致病病毒) > 节肢动物传播的病毒(虫媒病毒)
【关键词】 乙型脑炎病毒 结构蛋白 细胞系
【出 处】 《病毒学报》2009年 第4期 279-285页 共7页
【收 录】 中文科技期刊数据库

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