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前炎症细胞因子MDC和IL-18基因的快速克隆

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吴淑慧[1] 王晓凌[2] 崔海平[3] 高志云[2] 谢立新[2] 金玉怀[2]

[1]河北医科大学基础课教学部病原与预防教研室,河北石家庄050091 [2]河北医科大学基础医学院病原生物学教研室,河北石家庄050017 [3]河北省荣誉军人康复医院妇产科,河北邢台054000

《河北医科大学学报》

2007年第28卷第4期

摘　　要:

目的改进巨噬细胞源趋化因子（macrophage-derived chemokine,MDC）基因和白细胞介素-18（interleukin-18,IL-18）基因的克隆方法。方法BALB/c小鼠随机分为烫伤组和非烫伤组。烫伤组小鼠脾细胞经脂多糖刺激培养48h提取总RNA,其肺组织直接提取总RNA;非烫伤组脾细胞用前列腺素E2刺激培养72h后提取总RNA,肺细胞用脂多糖刺激培养12h后提取总RNA。两组小鼠脾细胞的总RNA分别经反转录-聚合酶链反应（reverse trascription-polymerase chain reaction,RT-PCR）扩增MDC基因片段,肺组织的总RNA分别用RT-PCR扩增IL-18基因片段。将扩增片段分别与pGEM-T载体连接,通过酶切和测序鉴定。结果烫伤组成功扩增出预期大小的DNA片段,序列测序证实为MDC cDNA和IL-18cDNA。非烫伤组均未扩增成功。结论烫伤组比非烫伤组易获得前炎症细胞因子,其有可能成为快速有效获取前炎症细胞因子的手段。 (共3页)