尼古丁对小鼠胚胎干细胞特异基因Oct-4转录的影响

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张华屏[1] 郭东星[1] 赵仰星[2] 王莲芸[3] 乔中东[2]

[1]四川大学基础与法医学院寄生虫学教研室,成都610041 [2]上海交通大学医学院,成都610041 [3]上海交通大学生命科学技术学院,成都610041

国际标准刊号：ISSN 1000-8020

国内统一刊号：CN 11-2158/R

摘　　要:

目的通过尼古丁对小鼠胚胎干细胞(Embuonic Stem，ES)特异基因Oct-4转录的影响来探讨尼古丁是否影响早期胚胎发育。方法 ES细胞选用饲养层培养法，尼古丁(1～1000nmol／L)和／或10μmol／L筒箭毒(尼古丁乙酰胆碱受体阻断剂)作用24h后，纯化ES细胞，提取总RNA。首先扩增Fgf-5以观察纯化后Es细胞的纯度；同时用半定量RT-PCR法观察尼古丁对Oct-4和β-actin表达的影响，及筒箭毒对尼古丁作用的影响。结果尼古丁对β-actin转录没有明显的影响，而可明显的增强Oct-4的转录；筒箭毒单独作用ES细胞可提高Oct-4的转录，而在尼古丁同时存在的情况下，筒箭毒对Oct-4的作用将随着尼古丁浓度的增加而减弱，当尼古丁的浓度为100～1000nmol／L时，筒箭毒可明显抑制尼古丁诱导的Oct-4的表达。结论研究表明，Oct-4的转录水平和胚胎干细胞的命运密切相关，维持胚胎干细胞的未分化状态需要Oct-4保持相对恒定的转录水平。因而，尼古丁对Oct-4转录的影响可能会影响胚胎干细胞的发育和分化，从而影响胚胎的早期发育。