牛病毒性腹泻病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立

高存福[1] 秦建华[1] 赵月兰[2] 包永占[1] 张宁[2]

[1]河北农业大学动物科技学院,河北保定071000 [2]河北省畜牧兽医研究所,河北保定071000

摘  要:

将牛病毒性腹泻病毒超免疫血清以常规方法提取IgG,采用过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶(HRP),建立了从粪样中检测牛病毒性腹泻病毒抗原的双抗体夹心ELISA。结果,抗体的最佳包被量为150μg/mL,酶标抗体最适工作浓度为1:200;封闭液为50mL/L的兔血清;待检粪样及酶标抗体的感作时间为37℃ 120min;底物显色时间为室温15min。应用建立的检测方法对河北省8个大中型奶牛场298份乳牛腹泻粪样进行了检测,结果,阳性检出率为42.6%。 (共3页)

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