人β防御素4基因的合成及克隆载体的构建

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曹玉红[1] 张光运[2] 张国成[1] 徐彦鸣[3] 张建[3]

[1]第四军医大学西京医院儿科,陕西西安710032 [2]第四军医大学西京医院神经内科,陕西西安710032 [3]第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西西安710032

国际标准刊号：ISSN 1007-8738

国内统一刊号：CN 81-1128

摘　　要:

目的：合成人β防御素4（HBD4）基因并构建其克隆载体.方法：根据GenBank中HBD4结构基因的序列, 设计合成了6条长度为32 ～60 bp的寡聚核苷酸片段, 用重叠延伸PCR法扩增合成HBD4 cDNA全长.PCR产物经双酶切后, 克隆入载体pMD18-T中, 并导入细菌中进行扩增.结果：HBD4基因的PCR产物和重组载体经凝胶电泳和酶切鉴定、测序分析证实, 合成的目的基因与设计的HBD4 cDNA的序列相一致, 并成功地克隆入克隆载体pMD18-T中.结论：用重叠延伸PCR法能方便、准确地获得目的基因片段.重组克隆载体pMD18-T-HBD4 的获得, 为构建HBD4基因的表达载体并表达奠定了基础.[著者文摘]