反义核酸技术对人血管内皮细胞的改造作用

赵东旭[1] 靳莎[1] 姜佳君[1] 王松[2] 李茂林[3] 朱鹤荪[2]

[1]北京理工大学生命科学与技术学院,北京100081 [2]北京理工大学材料科学与工程学院,北京100081 [3]北京邮电大学研究生院,北京100876

摘  要:

为降低在血栓形成早期血管内皮细胞分泌的血管性血友病因子(vWF)对凝血级联反应的触发效应,利用反义核酸技术构建降低vWF表达量的血管内皮细胞.人工合成vWF部分反义核酸(pvWF)片段,构建重组的真核表达载体pcDNA3.1(+)/pvWF.测序正确后用脂质体介导的方法转染血管内皮细胞,硫酸新霉素加压筛选后扩大培养转基因细胞,RT—PCR法检测转基因细胞中vWF mRNA的表达水平.结果表明,构建的vWF反义核酸真核表达载体能有效抑制细胞中vWFmRNA的表达,为新型抗凝血材料的研究提供一种基因改造的内皮细胞. (共4页)

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