贝类帕金虫间接酶联免疫吸附测定法的建立

樊景凤[1] 梁玉波[1] 宋立超[2] 张喜昌[3]

[1]国家海洋环境监测中心,辽宁大连116023 [2]沈阳农业大学土地与环境学院,辽宁沈阳110161 [3]中国科学院大连化学物理研究所,辽宁大连116023

摘  要:

采用液体巯基醋酸盐培养基(FTM)培养贝类帕金虫,以其制备抗帕金虫的免疫血清,建立一种快速检测贝类帕金虫的间接酶联免疫吸附测定法(iELISA)。方法中理想的包被抗原数量为104/mL;帕金虫抗血清最佳工作浓度1:10 000;酶标二抗工作浓度为1:1 000;进行血清敏感性测定,其最低检出限为102 /mL;阻断试验中的阻断率达86.77%;板内和板间变异系数分别为2.9%和3.21%。将该方法标准化后,对30份菲律宾蛤仔体内帕金虫进行检测,所得结果与用FTM方法得到的结果进行比较,后者灵敏度要高于前者,但是在检测时间上,前者在24 h内能够完成,而后者需要7 d。 (共3页)

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