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HCV e2-3pcx融合基因原核表达载体的构建及蛋白的初步表达

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李凤梅[1] 刘均洪[1] 任大明[2]

[1]青岛科技大学化工学院,山东青岛266042 [2]复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室,上海200433

青岛科技大学学报
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国际标准刊号:ISSN 1672-6987
国内统一刊号:CN 37-1107

摘  要:

构建了丙型肝炎病毒e2-3pcx融合基因的原核表达载体pET28b(+)-e2-3pcx,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中。IPTG诱导融合蛋白高效表达。经SDS-PAGE电泳分析,结果表明在43 ku处有一条蛋白质特异条带,与预期的目的产物蛋白带大小一致。[著者文摘]

gene;3 pcx gene;prokaryotic expression 丙型肝炎病毒(HCV)是慢性肝炎的主要原因之一,HCV感染者可能进一步发展为肝硬化、肝细胞癌。HCV基因组是一单股正链RNA,9.4 kb,含一个开放读码框架(ORF),编码的蛋白质为结构蛋白(包括核心蛋白C和包膜蛋白E1、E2)及非结构蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NSSA、NS5B)l1]全长大约由9 600个核苷酸组成。本工作利用基因重组技术,把已构建好的多表位抗原基因3pcx和包膜蛋白基因e2重组,将收稿日期:2006—11-03 作者简介:李风梅(1 974~)女,博士,讲师其克隆到原核表达载体大肠杆菌中的表达情况,疫苗奠定基础。1 实验部分pET28b(+),研究其在为进一步研究融合基因1.1 实验材料扩增e2和3pcx基因的特异性引物,上海生工公司;限制性内切酶BarnH I、EcoR I、Hind m,T4 DNA连接酶及Taq DNA聚合酶,......
Journal of Qingdao University of Science and Technology:Natutral Science Edition

栏目信息:

化学化工

分 类 号:

Q785

文献标识码:

B

文章编号:

1672-6987(2007)05-0383-03

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[参考文献]

Preliminary Construction and Expression of HCV e2-3pcx Fusion-gene Vector in E.coli

LI Feng-mei;LIU Jun-hong;REN Da-ming(1.College of Chemical Engineering;Qingdao University of Science and Technology;Qingdao 266042;China;2.State Key Laboratory of Genetic Engineering;Institute of Genetics;Fudan University;Shanghai 200433;China)

Abstract:

Prokaryotic expression vector for e2-3pcx fusion-gene of Hepatitis C Virus(HCV) was constructed into pET28b(+)-e2-3pcx vector,and was transformed into BL21(DE3).Upon induction by IPTG,e2-3pcx fusion-gene was expressed as a major protein product in the total cellular protein of the recombinant vector compared with all the controls.SDS-PAGE was used to analyze the expression of the fusion protein.The result showed that there was a specific band at about 43 ku in size,which was identical with the expected molecular weight of the fusion protein.[著者文摘]

Key words:

e2 gene;3pcx gene;prokaryotic expression

收稿日期: 2006-11-03

作者简介:

李凤梅(1974~)女,博士,讲师.

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