摘 要:
为建立成年活体嗅粘膜神经干细胞的简便、实用的体外培养方法，进而为神经干细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤的研究提供更为安全的候选细胞，本实验自成年大鼠活体分离剪取部分嗅粘膜经胰酶消化制成细胞悬液，接种于玻璃培养皿，用含10％胎牛血清的F12培养基培养，动态观察神经干细胞克隆球的形成及分化过程，并用nestin、NSE、GFAP、vimentin及laminin等抗体作免疫细胞化学染色，对阳性细胞进行形态学鉴定。结果显示，成年大鼠经嗅粘膜活体取材后，可长期存活。成体嗅粘膜细胞混合体外培养时不同类型细胞的贴壁时间存在差异，神经干细胞呈球形，不直接贴附于培养皿，仅粘着在首先贴壁的扁平基底细胞上分裂形成克隆球，球内细胞nestin免疫细胞化学染色阳性。原代培养14d后克隆球不再生长，球周细胞逐渐向外迁移分化为嗅细胞和嗅鞘细胞。提示，成体嗅粘膜神经干细胞可在普通培养基中形成干细胞克隆球，嗅粘膜中的其它细胞作为神经干细胞的基底饲养细胞有助于干细胞克隆球的形成；活体分离成体嗅粘膜作混合细胞体外培养获取神经干细胞的方法简便、安全、可行；本结果为嗅粘膜神经干细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤的可行性研究提供了动物实验资料。 (共6页)
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