应用噬菌体展示技术筛选原发性肝癌血清结合蛋白

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摘　　要:

目的：通过筛选原发性肝癌血清蛋白结合蛋白，探究肝癌的分子发病机制．方法：应用噬菌体展示技术，以肝癌患者的血清作为固相筛选分子，对T7 Select噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选过程，经噬斑的聚合酶链式反应（PCR）扩增后．对阳性PCR产物直接进行序列测定和同源性分析．结果：噬菌体经富集后，随机挑取48个噬斑进行PCR扩增，得到5种大小不同的PCR片断，序列测定后经序列同源性分析，结果发现与肝癌患者血清蛋白结合的蛋白有以下5种：人核仁螺旋体磷酸化蛋白NOLC1，人高度迁移基核小体结合域1fHMGN1），人依赖ATP的DNA连接酶1（LIG1），人小EDRK-丰富因子2（SERF2）和A—kinaseanchor protein 9 isofom．结论：用噬菌体人肝cDNA文库筛选得到了肝癌血清蛋白结合蛋白，为进一步阐明肝癌的发生及发病机制奠定了基础． (共4页)