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RAC1通过调节紧密连接蛋白1分布影响卵巢癌细胞的迁移和侵袭

《江苏大学学报:医学版》2020年 第5期 | 张璐玢 邹雪琴 张鳅丹 高淑君 刘雪 潘玲丽 赵杨静 梁秀婷 王荟 朱彦玲 邵启祥   江苏大学医学院 江苏镇江212013 江苏大学附属徐州医院妇产科 江苏徐州221005 江苏省检验医学重点实验室 江苏镇江212013
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摘 要:目的:探讨小GTP酶Rac1(Rac family small GTPase 1,RAC1)对卵巢癌细胞迁移和侵袭的影响及机制。方法:构建pLKO.1-puro RAC 1 shRNA载体,包装慢病毒,感染卵巢癌细胞OVCAR3和SKOV3,并采用嘌呤霉素筛选;通过蛋白质印迹、细胞划痕和基质胶侵袭实验分别检测细胞中RAC 1敲减效率,细胞迁移和侵袭能力的改变;采用蛋白质印迹和免疫荧光染色观察细胞中紧密连接蛋白1(tight junction protein 1,TJP1)的表达和分布变化。结果:酶切电泳和测序结果均显示pLKO.1-puro RAC 1 shRNA慢病毒载体构建成功,蛋白质印迹结果证实感染RAC 1 shRNA慢病毒的OVCAR3和SKOV3细胞中RAC1蛋白水平较对照组明显下降(P<0.05)。细胞划痕和基质胶侵袭实验证实,RAC 1敲减后卵巢癌细胞的迁移和侵袭能力较对照组显著下降(P均<0.01);蛋白质印迹结果显示RAC 1敲减后卵巢癌细胞中TJP1蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),但免疫荧光染色表明TJP1由胞质内散在分布转变为细胞间连接处聚集分布,细胞间连接更加紧密。结论:RAC 1基因可能通过改变TJP1蛋白分布从而影响卵巢癌细胞的迁移和侵袭。
【分 类】【医药、卫生】 > 肿瘤学 > 泌尿生殖器肿瘤 > 女性生殖器肿瘤 > 卵巢肿瘤
【关键词】 小GTP酶Rac1 紧密连接蛋白1 迁移 侵袭 卵巢癌
【出 处】 《江苏大学学报:医学版》2020年 第5期 408-413页 共6页
【收 录】 中文科技期刊数据库