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Scytovirin在大肠杆菌中的可溶性表达

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冯欣[1,2] 刘刚[1] 戴红梅[1] 汤国营[1] 游松[2]

[1]军事医学科学院生物工程研究所,北京100071 [2]沈阳药科大学,辽宁沈阳110016

《生物技术通讯》

2008年第19卷第1期

摘　　要:

目的：获得Scytovirin（SVN）蛋白及其多克隆抗体。方法：按照NCBI上公布的SVN基因序列设计合成引物，合成SVN基因，构建pET32c—SVN原核表达重组质粒，经限制性酶切分析、DNA序列测定插入片段正确；将该重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导重组蛋白表达；用离子交换层析法及金属亲合层析法纯化蛋白，采用Tris-Tricine系统分析；以经过纯化的蛋白为抗原免疫白兔，制备SVN多克隆抗体。结果：对表达产物进行了分离纯化，SVN纯度达到91％；用纯化的样品制备了多克隆抗体，抗血清效价为1：102400。结论：SVN在大肠杆菌表达系统中获得了高效可溶表达，并制备了其多克隆抗体，为进一步深入研究SVN提供了材料。 (共3页)