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肌细胞增强因子2A CAG重复序列的改变与其细胞学定位功能的相关性研究

戴大鹏 周晓阳 郑君德 张铁梅 蔡剑平   卫生部北京医院卫生部北京老年医学研究所卫生部老年医学重点实验室 北京100730
摘要:目的构建肌细胞增强因子2A(MEF2A)/绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体,检测其在Hela和293T细胞中的表达,探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其细胞学定位功能的相关性。方法用PCR法扩增野生型MEF2A基因全长cDNA序列,以及其他含4~15个CAG三联核苷酸重复序列的变异型MEF2A全长cDNA序列;将上述12种MEF2A全长cDNA序列分别克隆入带有GFP报告基因的真核表达载体pEGFP-C1,构建MEF2A野生型融合表达质粒pEGFP-MEF2A、变异型融合表达质粒pEGFP-MEF2A-CAGr;通过脂质体介导的方法将以上质粒转染到Hela和293T细胞,荧光显微镜检测GFP蛋白的表达。结果构建成功与GFP融合的野生型及变异型MEF2A蛋白表达质粒共12种用于细胞学定位功能研究,体外实验结果显示,上述12种MEF2A蛋白均定位于细胞核内。结论MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变不会影响其细胞内的定位功能。
格式:PDF     页数:4 页     页码范围:194-197页
学科分类:
关 键 词:突变 肌细胞 细胞学 质粒 转染 绿色荧光蛋白质类
来源期刊:《中华老年心脑血管病杂志》2009年 第3期
收录数据库:中文科技期刊数据库
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