两步法从慢性髓系白血病患者骨髓CD34^+细胞体外扩增诱导树突状细胞

杨栋林 刘庆国 阎嶂松 姜尔烈 黄勇 王玫 周征 翟文静 冯四洲 韩明哲

中国医学科学院,中国协和医科大学血液病医院,天津300020

摘  要:

目的探讨从慢性髓系白血病(CML)患者骨髓CD34^+细胞体外扩增诱导树突状细胞(DC)的可行性,并比较CML-DC和正常DC的生物学特性。方法免疫磁珠法从CML患者和正常供者骨髓纯化CD34^+细胞,在有血清条件下应用两步法:干细胞生长因子(SCF)+FLT3配体(FL)+促血小板生成素(TPO)+白细胞介素-3(IL-3)扩增2周,然后以粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)+白细胞介素-4(IL-4)+肿瘤坏死因子-α(TNF-α)(GI方案)诱导DC。通过相差显微镜、电子显微镜、流式细胞仪分析DC的生物学特性,荧光原位杂交(FISH)检测培养前后CML细胞的bcr/abl融合基因表达。结果诱导后细胞较0d或诱导前细胞高表达DC相关抗原(CD1a,CD80,CD86,CD40,CD54,HLA-DR)。CML患者和正常供者CD34+细胞经GI方案诱导10d,CD1a阳性率分别为36.90%±26.94%和54.35%±16.34%,CD1a^+DC数是0d接种细胞的(54±54)倍和(122±129)倍。两组相比,总细胞扩增倍数、DC扩增倍数、细胞表型均无明显差异,诱导后的DC具有相似的超微结构。CML患者CD34^+细胞诱导10d后bcr/abl融合基因阳性率为43.67%±21.55%,具有典型DC形态的细胞bcr/abl融合基因阳性率为53.2%。结论两步法GI方案能诱导CMLCD34^+细胞产生大量DC,诱导生成的DC不但具有正常DC的典型形态、表型,而且起源于CML细胞。
页  数:
共6页
页码范围:
218-223页

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