生物学 >> 现代生物医学进展 >> 2006年6卷10期 >> 摘要

结核分枝杆菌菌体蛋白双向电泳技术的优化

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张鹭[1,2] 王庆忠[2] 路福平[1] 王洪海[2]

[1]天津科技大学生物工程学院、天津市工业微生物学重点实验室,天津300222 [2]复旦大学生命科学学院遗传工程国家重点实验室、遗传学研究所,上海200433

《现代生物医学进展》

2006年第6卷第10期

摘　　要:

目的：提取结核分枝杆菌菌体蛋白并建立一种利用双向电泳分离结核分枝杆菌蛋白质组的方法。方法：分离提取结核分枝杆菌菌体蛋白。样品采用不同pH梯度的鹏胶条进行第一向等电聚焦，12％SDS—PAGE凝胶进行二向电泳。银染后双向电泳图谱用Molecular Image Fx激光图像扫描仪扫描，PDQuest6．0软件完成配比分析。结果：优化了结核分枝杆菌菌体蛋白的提取方法，用裂解液8mol／L尿素结合2mol／L硫脲，140mmol／LDTT，0．5％biolyte，4％CHAPs，400mg／m1lOG处理，成功提取了蛋白，并通过结核分枝杆菌双向电泳技术体系的优化，建立了结核分枝杆菌菌体蛋白的分解图谱。pH4—7及pH7—10两胶面上共1387个点，占所检测到的蛋白总数的86％，绝大部分（1194个）蛋白位于pH4—7范围内。结论：为进一步开展结核分枝杆菌的比较蛋白质组学研究提供了方法学参考。 (共4页)