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产气肠杆菌菌体内核苷磷酸化酶的诱导表达

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魏晓琨[1,4] 刘岩岩[2] 周丽娜[2] 丁庆豹[3] 王昌禄[1]

[1]天津科技大学生物工程学院,天津市工业微生物重点实验室,天津300457 [2]齐齐哈尔大学生命科学与工程学院,齐齐哈尔161005 [3]华东理工大学生物反应器工程重点实验室,上海200237 [4]上海蔚平生物科技有限公司,上海200235

《现代生物医学进展》

2008年第8卷第2期

摘　　要:

目的：阿糖腺苷（Ara—A）是一种广谱抗病毒药物，临床上用于治疗多种病毒性疾病，同时也是合成阿糖腺苷单磷酸（Ara—AMP）的重要原料。本课题旨在寻找一种高效酶法生产嘌呤类阿糖核苷的方法。方法：以产气肠杆菌完整细胞为酶源，研究产气肠杆菌菌体培养条件对核苷磷酸化酶的影响及其诱导性。结果：胸苷磷酸化酶、尿苷磷酸化酶和嘌呤核苷磷酸化酶均可被多种核苷、核苷酸甚至碱基诱导。胞苷或胞苷酸的添加量为15—20mmol／L，诱导时间在0—8小时均可。经胞苷和胞苷酸诱导的菌体可使酶反应时间缩短6倍，大大提高了反应效率。经诱导的菌体，在反应后仍保持较高的核苷磷酸化酶活力；而未经诱导的菌体，一次反应后即丧失大量的酶活力。结论：核苷磷酸化酶的活性可以通过诱导而提高，以此优化阿糖腺苷的生产。