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不同类型载体携带Math1—EGFP基因对293T细胞转染效率及细胞毒性的研究
任丽丽 杨仕明 解放军总医院耳鼻咽喉头颈外科 解放军耳鼻咽喉研究所耳神经生物中心 北京100853第1页
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| 《中华耳科学杂志》2009年 第4期 | 摘要：目的比较腺病毒、脂质体、纳米材料三种不同类型的载体携带目的基因对293T细胞的转染效率及细胞毒性的大小,筛选理想的基因载体。方法用重组腺病毒、Lipofectamine^TM 2000、Entranster^TM—D纳米材料为转染载体,携带含有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）报告基因的Math1-EGFP基因及真核表达质粒pRK5-Math1—EGFP，按照转染试剂盒说明优化其转染条件，分别转染293T细胞。24小时后在共聚焦显微镜下观察转染结果并计数阳性细胞率，采用RT—PCR法检测转染细胞中Math1基因mRNA的表达，用MTT法检测不同转染条件下，不同转染载体对293T细胞的细胞毒性。结果经优化转染条件，重组腺病毒载体转导的细胞中荧光蛋白表达几乎为95％以上,Lipofectamine^TM 2000、Entranste^TM-D纳米材料载体转染的细胞中荧光蛋白表达也分别达到70％和80％以上，而Entranste^rTM-D纳米材料载体在最高转染效率的剂量下仍然保持80％以上的细胞生存率。RT-PCR进一步证实，三种载体转染细胞均有Math1基因mRNA的表达。结论Entranster^TM—D纳米载体作为一种新型纳米聚合物转染试剂，能成功携带内耳基因治疗关键基因Math1基因转染293T细胞，并表现了低毒、高效性能。 | |
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| 格式：PDF 页数：5 页 页码范围：347-351页 | ||
| 学科分类： | ||
| 关 键 词：Math1 293T细胞 基因转染 基因载体 纳米材料 | ||
| 来源期刊：《中华耳科学杂志》2009年 第4期 | ||
| 收录数据库：中文科技期刊数据库 | ||
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