您的位置：网站首页 > 《中文科技期刊数据库》 > 医药卫生 > 基础医学 > 人体生理学 > 摘要
人MCHR2基因shRNA真核表达载体构建及鉴定
袁成福 杨俊霞 魏丽丽 刘革力 石华 陈济 易发平 马永平 宋方洲 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室 重庆400016 教育部临床检验诊断学重点实验室 湖北民族学院医学院生物化学教研室
|
摘要：目的构建针对人黑色素浓集激素受体2（MCHR2）的shRNA真核表达载体,并在人胚肾293（HEK293）细胞中观察其对MCHR2基因表达的影响。方法根据MCHR2基因序列,设计并合成特异性的小干扰片段,并将其定向克隆到带有卡那霉素抗性和增强绿色荧光蛋白的真核表达载体pGenesil-1中,对重组质粒进行酶切分析和DNA序列测定。用脂质体将重组质粒转染到HEK293细胞中,观察其在mRNA和蛋白水平对MCHR2的影响。结果通过酶切鉴定和序列测定,成功构建四条表达短发夹RNA的质粒及其阴性对照质粒,并成功转染到HEK293细胞株中。四条shRNA真核表达载体在mRNA水平对MCHR2抑制率分别为54.9%、66.4%、56.9%、45.8%;在蛋白水平对MCHR2抑制率分别为62.0%、81.0%、73.3%、44.2%。结论针对人MCHR2的shRNA真核表达载体成功构建及鉴定为进一步研究MCHR2功能奠定了良好的基础。 | |
|---|---|---|
| 格式：PDF 页数：4 页 页码范围：355-358页 | ||
| 学科分类： | ||
| 关 键 词：基因,MCHR2 短发夹RNA 真核表达载体 细胞转染 | ||
| 来源期刊：《解放军医学杂志》2007年 第4期 | ||
| 收录数据库：中文科技期刊数据库 | ||
|
||
