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重组人DcR3腺相关病毒的构建和表达
王槐志 黎万玲 董家鸿 倪兵 吴玉章 第三军医大学西南医院全军肝胆外科研究所 第三军医大学基础医学部全军免疫学研究所 重庆400038
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摘要：目的克隆人DcR3基因于腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）载体pAAV-IRES-hrGFP中，以获得高感染滴度及纯度的重组人DcR3腺相关病毒，为将其用于感染移植肝，研究其对大鼠移植肝的保护作用打下基础。方法用基因重组的方法构建含全长人DcR3基因的重组腺相关病毒骨架质粒，利用脂质体法将腺相关病毒载体系统共转染人病毒包装细胞AAV-293细胞中，合成重组DcR3腺相关病毒，经PEG／氯仿纯化，用SDS-PAGE鉴定其纯度，扫描电镜观察病毒颗粒形态，倍比稀释法测定重组病毒的感染滴度。并用重组病毒感染COS-7细胞鉴定DcR3的表达。结果正确构建组装重组人DcR3腺相关病毒，纯化后病毒感染滴度为1．1×10^10U／mL。在重组DcR3腺相关病毒感染的COS-7细胞上清液中检测到了DcR3的表达。结论成功构建了重组人DcR3腺相关病毒，为下一步研究DcR3对大鼠移植肝的保护作用打下基础。 | |
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| 格式：PDF 页数：4 页 页码范围：487-490页 | ||
学科分类：
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| 关 键 词：基因 DcR3 腺相关病毒 | ||
| 来源期刊：《免疫学杂志》2006年 第5期 | ||
| 收录数据库：中文科技期刊数据库 | ||
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