小鼠LRP16基因同源重组ES细胞克隆的鉴定

韩为东[1] 伍志强[1] 赵亚力[1] 司艺玲[1] 母义明[2] 孟元光[3] Masatoshi Nomura[4]

[1]解放军总医院分子生物室,中国北京100853 [2]解放军总医院内分泌科,中国北京100853 [3]解放军总医院妇产科,中国北京100853 [4]九州大学医学院第三内科,日本福岗812-8582

摘  要:

目的:为深入研究LRP16基因的生理功能,本研究将小鼠LRP16基因特异打靶载体pBA16转染小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell),并筛选同源重组克隆。方法:通过电转染方法将LRP16插入失活型打靶载体导入ES细胞,经G418筛选,挑取抗性克隆,Southern blot方法鉴定同源重组ES细胞克隆。结果:打靶载体成功转染ES细胞,Southern blot筛选100个抗性克隆,结果显示有一个打靶序列同源重组型插入的Es细胞克隆。结论:筛选到同源重组型ES细胞,为下一步建立LRP16缺失型小鼠并为从整体水平研究LRP16基因的生理功能奠定基础。

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