铜离子对绵羊PrP^C重组蛋白结构转化的影响

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摘　　要:

为探明铜离子在朊蛋白构象转化中的作用机制，进一步研究构象病发生机制提供基础数据，利用DNA重组技术，绵羊朊病毒蛋白在大肠杆菌BL2l（DE3）中高效表达，获得绵羊PrP^C重组蛋白（OvPrP^C），与氯化铜在体外结合。对CuCl2处理后的蛋白进行圆二色谱（CD）和蛋白酶K（PK）消化试验进行转化调节后蛋白抗性分析。结果表明，OvPrP^C分子量为25172．80U，其二级结构主要由α-螺旋构成，含少量β-折叠。经过CuCl2体外调节后，OvPrP^C结构中α-螺旋减少，β-折叠增加。而蛋白酶K消化后，CuCl2作用后的蛋白产生了PK抗性。为进一步的神经细胞毒性试验提供了宝贵的材料，进而为探讨构象病发生机理提供有力的科学依据。 (共5页)