口蹄疫病毒RT-PCR检测和分型方法的建立及初步应用

曲哲会 王君伟

东北农业大学动物医学院,黑龙江哈尔滨150030

摘  要:

参考GenBank中各个血清型口蹄疫病毒3D、vp1、2A基因的标准序列,设计引物P1/P2和S1/S2。建立用于检测口蹄疫病毒及其利用引物S1/S2克隆片段同源性比较而确定血清型的RT-PCR方法。通过敏感性试验检测,2对引物均可以检测到10TCID50的病毒量;特异性试验的检测,2对引物对正常细胞、牛黏膜病病毒、猪瘟病毒、水疱性口炎病毒、牛传染性鼻气管炎病毒的检测结果均为阴性。利用该方法对病牛的流涎液体、水疱液体、舌皮组织、感染犊牛心脏等组织进行检测初步结果显示:该方法可以对O型和AsiaⅠ型口蹄疫病毒进行特异性检测,能够用于口蹄疫急性及亚临床感染的诊断及流行病学调查。 (共5页)

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