禽腺联病毒全基因组的克隆及感染性病毒的拯救
王建业 孙怀昌 朱国强
扬州大学兽医学院,江苏扬州225009
摘 要:
为了克隆禽腺联病毒（Avian adeno-associated virus，AAAV）全基因组用于构建基因转移载体研究，以鸡胚致死孤儿病毒（CELO）作为辅助病毒与AAAV共接种SPF鸡胚进行AAAV的增殖，将AAAV约4．7kb双链基因组DNA与pCR2．1载体连接，构建了含AAAV全基因组的重组质粒pAAAV并进行了测序。序列分析表明，AAAVYZ-1株的基因组为4684bp，两端具有141bp的末端倒置重复序列和Rep蛋白结合位点特征序列，与GenBank中收录的AAAV DA-1株和VR-865株的核苷酸序列同源性分别为95．0％和92．2％。将pAAAV质粒转染CELO病毒感染的鸡胚肝细胞系，获得了感染性AAAV病毒粒子，结果证明克隆的AAAV基因组中存在与病毒复制和包装相关的正确关键序列，可用于重组AAAV载体的构建。 (共5页)
学科分类:
Q784[生物科学 > 分子生物学 > 基因工程(遗传工程） > 基因的重组] S852.65[农业科学 > 畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂 > 动物医学（兽医学） > 兽医基础科学 > 家畜微生物学（兽医病原微生物学） > 家畜病毒学]
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