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重组鸭α-干扰素基因工程菌表达条件的研究

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杨梅[1] 程安春[1,2] 汪铭书[1,2] 张瑶[2] 龚永强[1] 陈斌[1,3]

[1]四川农业大学动物科技学,四川雅安625014 [2]动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014 [3]四川省兽医防疫总站,成都610041

《四川农业大学学报》

2007年第25卷第3期

摘　　要:

摘要：为了确定重组鸭α-干扰素（DuIFN—α）基因工程菌BL21（DE3）/pEW32a^＋-DuIFN—α的最佳表达条件，对影响原核表达的主要因素：IPTG浓度、诱导时期、收获时间、培养诱导温度、葡萄糖浓度及培养基进行了优化；并利用抗性筛选对表达质粒的稳定性进行了研究。结果显示，诱导基因工程菌BL21（DE3）/pEW32a^＋ -DulFN—a表达DuIFN—α的最佳条件为：以TB＋5g九葡萄糖培养基37℃培养至菌体OD600=0．8～1．1时，加入IPTG至终浓度0．2mmol/L，30℃诱导培养4～5h。在最佳表达条件下，DuIFN—α的相对含量为34．1％，总含量（终菌体浓度×相对含量）达79．9；各种优化条件对表达质粒的稳定性未见明显影响。