摘 要:
目的建立实时荧光定量PCR（RTFQ-PCR）检测人晚期糖基化终末产物受体（RAGE）mRNA的方法并研究其在食管癌组织中的表达。方法根据Genebank提供的序列在RAGE基因外显子5和6之间设计引物，应用SYBR GreenⅠ荧光染料，建立检测RAGE mRNA的RTFQ-PCR方法，并对其线性、特异性、灵敏度及重复性进行评价；根据标准曲线计算出食管癌及配对远端正常组织中RAGE mRNA含量，并以RAGE mRNA和18SrRNA含量的比值作为评价RAGE mRNA表达水平指标。结果线性范围为5．0×10^3～5．0×10^9copies／ml，相关系数为-0．98，批内变异系数（CV）为0．63％～8．71％，批间CV为1．52％～12．38％。食管癌及配对远端正常组织RAGE mRNA与18SrRNA浓度的对数比值（^-x±s）分别为0．638±0．068和0．334±0．329（P〈0．005），提示食管癌组织RAGE表达上调。结论RTFQ-PCR检测RAGE mRNA的方法具有灵敏、特异、重复性好等优点，RAGE mRNA表达水平与食管癌存在一定相关性。 (共4页)
cqvip.com