摘 要:
目的 从日本血吸虫成虫cDNA文库中分离、鉴定和分析全长cDNA序列，为日本血吸虫病的防治提供候选疫苗和药物靶点。方法 从构建日本血吸虫成虫cDNA文库中挑取重组阳性克隆进行5’测序获取表达序列标签(Expressed Sequence Tag，EST)．在此基础上进行引物延伸法(primer extension)测序，直至获取全长cDNA序列，将获取的基因登录Gen-Bank。并进行生物信息学分析。结果 获得7个日本血吸虫全长cDNA序列(GenBank登录号分别为AY336493-AY336499)，其中6个为日本血吸虫新基因：类转录因子BTF3(similar to transcription factor BTF3)、延长因子1-α(elongation factor 1-alpha，EF1-α)、富含谷氨酰胺四联重复肽(small glutamine-rich tetratricopeptide，TRP)、鸟氨酸氨基转移酶(ornithine aminotransferase，OA)、内皮差异相关因子1(endothelial differentiation-related factor1，EDF-1)和类基因转录增强因子(similar to testis enhanced gene transcri ptprotein，TEGT)；另1个是精氨酸酶(arginase)基因，比原发现的基因序列长456bp。生物信息学分析发现类基因转录增强因子为跨膜蛋白。具有6个跨膜区；各基因与人、鼠、蟾和曼氏血吸虫等物种的基因有37％～85％的同源性；蛋白结构和功能预测分析显示各基因分别含有NAC基元、精氨酸酶家族特征性序列、TEF基元、TRP基元、转氨酶基元、HTH-XRE基元和NAF位点，预示各基因分别具有相应的功能。结论 EST技术和引物延伸法有助于快速、经济地获取和研究日本血吸虫表达基因。 (共4页)
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