弓形虫复合抗原基因P30-ROP2在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定

• 注册维普会员须知
• PDF提取文图方法
• 几种不同的服务模式
• 免费下载PDF阅读器

摘　　要:

目的构建含弓形虫主要表面抗原P30与致密颗粒蛋白ROP2复合基因重组质粒，并在毕赤酵母中表达、纯化与鉴定。方法用亚克隆技术把P30-ROP2复合基因克隆入表达载体，构建酵母表达载体pGAPZaA-P30-ROP2；线性化重组酵母表达载体，电穿孔法导入毕赤酵母GS115中，抗生素Zeocin筛选、PCR法鉴定阳性转化子；酵母工程菌大量摇瓶表达，纯化产物，免疫活性鉴定。结果获得pGAPZaA-P30-ROP2重组表达载体，SDS-PAGE和Western Blot结果显示P30-ROP2复合基因表达蛋白产物分子量约为66kD，具有一定的免疫活性。结论弓形虫复合抗原基因P30-ROP2在毕赤酵母中成功分泌表达。表达产物具有免疫活性，为弓形虫病诊断抗原及疫苗研制奠定基础。 (共4页)