摘 要:
目的观察HSV—tk／GCV系统对人Tenon囊成纤维细胞（HTFs）的旁观者效应并研究其作用机制。方法将转HSV—tk基因HTFs（HTFs—tk）与正常HTFs于两种接种密度下以不同比例混合，加入5μg／ml更昔洛韦作用5d，MTT法检测对HTFs的杀伤作用；染料传输法观察HTFs细胞间隙连接细胞间通讯（GJIC）的能力；免疫细胞化学检测Cx43分布；RT—PCR及Westernblot检测Cx43表达。结果旁观者效应随HTFs—tk／HTFs比例增加而增强，高细胞接种密度组明显强于低密度组；染料通过GJIC传输6级以上；Cx43主要分布于HTFs细胞膜并检测到其mRNA与蛋白表达。结论旁观者效应需要细胞间密切接触，Cx43介导GJIC可能是HSV—TK／GCV系统对HTFs产生旁观者效应的主要机制，HTFs表达Cx43可能在结膜伤口愈合反应中发挥重要作用。
