摘 要:
目的研究2型重组腺相关病毒（recombinant adenc-associated virus2，rAAV2）载体介导增强型绿色荧光蛋白基因（enhanced green fluorescent protein，EGFP）对体外培养兔晶状体上皮细胞（N／N1003A）的转染和病毒载体对晶状体上皮细胞增生的影响，探讨rAAV2作为后囊膜混浊基因治疗载体的可行性。方法rAAV2-EGFP按感染复数（multiplicity of infection，MOI）为100、10^5、2×10^5、10^6转染N／N1003A细胞，倒置荧光显微镜下观察晶状体上皮细胞中EGFP的表达，流式细胞仪检测rAAV2-EGFP对N／N1003A细胞的转染效率，MTT比色法测定rAAV2载体对N／N1003A增生的影响。结果EGFP在细胞中的表达呈绿色，弥漫于整个胞浆。rAAV2-EGFP的转染效率随着MOI的增加和时间的延长而增加，MOI=10^6时，转染后第7d达到71.12％．MTT法显示各转染组与未转染组A值无统计学差异。结论重组腺相关病毒载体可以介导EGFP基因高效稳定转染晶状体上皮细胞，并且对细胞增生无抑制作用，腺相关病毒作为后囊膜混浊基因治疗载体是可行的。
