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摘要:目的 构建人MCHR2真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、Western blot及免疫荧光法检测MCHR2的表达。结果 成功构建了pcDNA3.1(+)/MCHR2真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达目的基因。结论 真核表达载体成功构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR2的功能奠定良好的实验基础。 | |
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| 格式:PDF 页数:4 页 页码范围:32-35页 | ||
| 学科分类: | ||
| 关 键 词:MCHR2 真核表达载体 稳定转染的CHO细胞系 基因表达 | ||
| 来源期刊:《第三军医大学学报》2007年 第1期 | ||
| 收录数据库:中文科技期刊数据库 | ||
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