摘 要:
目的研究3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中是否有胆碱能系统物质mRNA的表达，及烟碱样乙酰胆碱受体（nAChR）胡功能状态对脂肪因子肾上腺髓质素（AM）mRNA表达的影响，初步阐明脂肪细胞中非神经胆碱能系统与肥胖、胰岛素抵抗及其他脂代谢性疾病的关系。方法以3T3-LI前脂肪细胞和诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞为研究对象，采用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中是否有乙酰胆碱酯酶（AChE）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）和nAChR α7三种胆碱能系统主要组分的mRNA表达；对前脂肪细胞及成熟脂肪细胞分别予不同水平的广谱nAChR激动剂尼古丁、特异性nAChR α7激动剂氯化胆碱及特异性nAChR α7拮抗剂甲基牛扁亭碱处理12、24、36h，并设立相应处理时间的空白对照组，应用RT—PCR方法检测前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AM mRNA的表达。结果1．RT—PCR方法证实在3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中均有AChE、ChAT、AChR α7的mRNA表达。2．给予不同剂量的尼古丁和氯化胆碱，干预作用不同时间，3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AM mRNA表达水平与相应的空白对照组比较均呈剂量依赖性升高（P〈0．05或P〈0．01），但随干预作用时间延长，这种剂量依赖性上调效应减弱。二种激动剂以氯化胆碱的剂量依赖性上调效应更明显。而相同剂量下不同作用时间的处理组间无统计学差异（Pa〉0．05）。3．拮抗剂甲基牛扁亭碱对3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中AM mRNA表达则呈明显的剂量依赖性抑制作用（P〈0．05或P〈0．01）。结论3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞中存在非神经元型胆碱能系统，其中nAChR α7调节脂肪因子AM mRNA的表达，脂肪组织中非神经元型胆碱能系统的重要组分nAChR α7可能在肥胖、胰岛素抵抗及其他脂代谢相关疾病的病理生理过程中发挥重要作用。
