摘 要:
目的 筛选MDR1沉默的人乳腺癌细胞并比较其生物学特性。方法采用BLOCK-iT Lentiviral RNAi Expmssion System生产表达MDRI基因shRNA的慢病毒载体，转导敏感人乳腺癌细胞MCF-7和耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7／ADM，杀稻瘟菌素（blasticidin）筛选获得MDR1稳定沉默细胞MCF-7／RNAi和MCF-7／ADM／RNAi。定量RT-PCR检测MDR1 mRNA表达，流式细胞术检测P-GP蛋白表达和功能，MTT法检测药物敏感性。结果经10mg／L blasticidin筛选12d获得MCF-7／RNAi和MCF-7／ADM／RNAi细胞。MCF-7、MCF-7／RNAi、MCF-7／ADM和MCF-7／ADM／RNAi细胞的MDR1 mRNA相对表达水平分别为1、0．13、17．14和2．01；P-GP表达分别为（1．5±0．3）％、（1．2±0．2）％、（89．4±3．6）％和（16．3±1．9）％；细胞内Rh123的潴留分别为（92．4±3．1）％、（90．6±4．0）％、（13．6±1．6）％、（72．4±2．8）％IC50值分别为0．90、0．92、19．61和4．04mg／L。结论应用慢病毒载体稳定沉默MDR1基因可有效逆转人乳腺癌细胞耐药性。 (共6页)
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