抗β淀粉样肽40人单克隆抗体在昆虫细胞分泌表达
蔡炯[1] 郭瑜[2] 梁米芳[2] 李方[1] 刘飞[1] 王世真[1]
[1]中国医学科学院 中国协和医科大学北京协和医院核医学科,100730 [2]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,100730
摘 要:
目的 通过杆状病毒昆虫细胞系统重组表达抗β淀粉样肽40人单克隆抗体,为全人抗体治疗阿尔茨海默病创造条件.方法 将抗β淀粉样肽40人单链抗体重链可变区和轻链可变区分别克隆插入pAC-L-CH3的多克隆位点,构建成pAC-VH-VL表达质粒.将表达质粒和BaculoGold共转染SF9细胞后,用免疫荧光方法进行人IgG表达的检测.将感染重组杆状病毒的昆虫细胞培养液上清过蛋白A-琼脂糖亲和层析柱,洗脱纯化出的抗体经过SDS-PAGE电泳鉴定纯化蛋白质.结果 杆状病毒昆虫细胞系统抗β淀粉样肽40人单克隆抗体表达质粒pAC-VH-VL构建成功.将表达质粒和辅助病毒感染昆虫细胞后可见昆虫细胞表达人抗体.经过蛋白A-琼脂糖亲和层析,从昆虫细胞培养基中纯化出抗β淀粉样肽40人单克隆抗体.结论 通过基因工程手段在人抗Aβ40抗体可变区羧基端连接人抗体恒定区片段,通过杆状病毒昆虫系统分泌表达并纯化获得完整的人抗Aβ40单克隆抗体. (共4页)
学科分类:
R373.9[医药、卫生 > 基础医学 > 医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学） > 人体病毒学（致病病毒） > 其他病毒]
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