生物学 >> 兽医大学学报 >> 2003年23卷3期 >> 摘要

大肠杆菌多药耐药基因AcrA的克隆及其原核表达

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马红霞[1] 邓旭明[2] 阎继业[2] 张英霞[1] 欧阳红生[2]

[1]吉林农业大学动物科技学院,吉林长春130118 [2]解放军军需大学动物科技系,吉林长春130062

《兽医大学学报》

2003年第23卷第3期

摘　　要:

从大肠杆菌AcrA的编码序列中设计引物，以大肠杆菌基因组为模板，扩增出AcrA基因中约691bp的cDNA片段，将所得片段与pMD—18T载体连接，转化到DH5α大肠杆菌中，成功地筛选到阳性克隆，其质粒测序结果与文献报道一致。从阳性克隆中提取质粒，经HindⅢ和BamHI酶解，回收691bp的目的片段，定向克隆到pET—28a表达载体中，提取质粒，再次转化到BL21(DE3)中，成功地筛选出阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌，通过SDS—PAGE检测出AcrA部分基因的表达。 (共3页)