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低剂量三氯乙烯诱导人正常肝细胞损伤耐受差异表达基因的研究

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卫秦芝[1] 庄志雄[3] 袁建辉[3] 黄海燕[1] 李习艺[1] 杨晓华[1] 庾蕾[3]

[1]中山大学公共卫生学院,广州510080 [3]深圳市疾病预防控制中心,广州510080

《卫生研究》

2005年第34卷第4期

摘　　要:

目的寻找低剂量三氯乙烯(TCE)诱导人正常肝细胞(L-02)损伤耐受差异表达的基因。方法参照本实验室用MTT法所得的TCE对L-02毒性剂量一效应关系，选择5μmol／L的三氯乙烯为低剂量，40μmol／L为高剂量，按以下方式对细胞进行染毒：空白对照、低剂量、高剂量、损伤耐受组(先用低剂量刺激24小时，再用高剂量刺激6小时)，然后用荧光差异显示PCR(Fluoro DD-PCR)寻找不同方式刺激差异表达的基因，并对差异表达基因进行克隆、鉴定。结果按方法所示的方式处理细胞，处理完毕后提取各组细胞总RNA，进行荧光差异显示PCR，找到51个差异条带。对其中的11个差异条带进行克隆鉴定同源性比较，发现其中9个已知基因，2个新基因。结论用荧光差异显示PCR方法寻找TCE诱导L-02损伤耐受过程差异表达的基因，通过鉴定基因，为进一步研究TCE诱导L-02的损伤耐受的机理提供科学依据。 (共4页)